SDS-PAGE 凝膠配制試劑盒說明書

【資料簡介】

For Research Use Only

 

僅供研究用

  EnoGene™ SDS-PAGE 凝膠配制試劑盒

 

（EnoGene™ SDS-PAGE Gel Preparation Kit）

 

 

LOT:QY-AB1140

 

SDS-PAGE 凝膠配制試劑盒

一、產品介紹

 

SDS-PAGE 凝膠配制試劑盒提供了配制 SDS-PAGE 凝膠所需的各種試劑，用戶只需自備制膠器具和蒸餾水，即可配制

 

PAGE 膠了。SDS-PAGE 凝膠配制試劑盒不僅可用于配制 SDS-PAGE 凝膠，也可用于配制非變性(native)PAGE 凝膠。本試劑盒約可配制 10-50 塊常規大小的 PAGE 膠(即聚丙烯酰胺凝膠)。

二、試劑盒組份

 

組	份	E1WP302	儲存
30% Acr-Bis（29：1）		100 mL	4℃
1M Tris-HCl, pH8.8		100 mL	4℃
1M Tris-HCl, pH6.8		25 mL	4℃
10% SDS		5mL	4℃
Ammonium Persulfate(過硫酸銨)		1g	4℃
TEMED		0.5mL	4℃

 

三、試劑盒以外自備儀器和試劑

 

可調移液器、垂直板電泳儀、雙蒸水

 

SDS-PAGE 凝膠配制試劑盒四、操作步驟

 

1、 根據目的蛋白的分子量大小選擇合適的凝膠濃度，再按照下面的表格配制SDS-PAGE的分離膠(即下層膠)：不同濃度的SDS-PAGE分離膠的分離范圍：

 

SDS-PAGE 分離膠濃度	分離范圍
6%膠	50-150kD
8%膠	30-90kD
10%膠	20-80kD
12%膠	12-60kD
15%膠	20kD 以下

 

2、按照下面的配方進行配制（總體積為15ml），如有體積變動可按比例進行放大或縮小。過硫酸銨配制成10%溶液后（0.5g中加入4.5ml蒸餾水溶解），分裝成小管-20℃保存，通常半年內有效。

注：如果配制非變性膠，參考上述配方，不加10%SDS即可配制成非變性PAGE膠。

 

貯液（ml）	分離膠中丙烯酰胺的終濃度（%）
	6	8	10	12	15
蒸餾水	6.0	5.0	4.0	3.0	1.5
30% Acr-Bis（29：1）	3.0	4.0	5.0	6.0	7.5
1M Tris-HCl, pH8.8	5.7	5.7	5.7	5.7	5.7
10% SDS	0.15	0.15	0.15	0.15	0.15
10%的過硫酸銨	0.15	0.15	0.15	0.15	0.15
TEMED	0.01	0.01	0.01	0.01	0.01

 

For Research Use Only

 

僅供研究用

 

 

3、 按照如下表格配制SDS-PAGE的濃縮膠(也稱堆積膠、積層膠或上層膠)：

 

成分	配制不同體積 SDS-PAGE 濃縮膠所需各成分的體積(毫升)
5%膠	2	3	4	6	8	10
蒸餾水	1.4	2.1	2.7	4.1	5.5	6.8
30% Acr-Bis（29：1）	0.33	0.5	0.67	1.0	1.3	1.7
1M Tris-HCl, pH6.8	0.25	0.38	0.5	0.75	1.0	1.25
10% SDS	0.02	0.03	0.04	0.06	0.08	0.1
10%的過硫酸銨	0.02	0.03	0.04	0.06	0.08	0.1
TEMED	0.002	0.003	0.004	0.006	0.008	0.01

 

五、注意事項：

 

1、所過硫酸銨配制成10%溶液后，應當-20℃保存。同時應盡量減少室溫存放時間，以防失效。

 

2、 TEMED宜避光保存。另外凝膠凝聚的速度和溫度及光照關系密切，可通過適當調節TEMED的用量，控制在不同的室

 

內環境下凝膠凝聚的速度。

 

3、請穿實驗服并戴一次性手套操作。

 

4、

 

六、保存條件：

 

1M Tris-HCl, pH8.8、10% SDS、Ammonnium persulfate (過硫酸銨) 粉末和1M Tris-HCl, pH6.8室溫或4℃保存。30% Acr-Bis (29:1)和TEMED 4℃避光保存。

 

過硫酸銨配制成10%溶液后（0.5g中加入4.5ml蒸餾水溶解，1g中9ml蒸餾水溶解），分裝成小管-20℃保存，通常半年內有效。